噬菌體篩選對理化因素的抵御力比普通細菌的繁殖體強，個別經(jīng)75℃30分鐘以上才失去活性，對紫外線敏感。噬菌體是侵襲微生物的病毒，可沾染細菌、真菌、螺旋體和支原體等。噬菌體只借居于易感宿主菌體內(nèi)，故可用于細菌的鑒定和分型。噬菌體結構簡單，基因數(shù)量少，其宿主細胞易于培育，是基因工程和分子生物學研討的主要工具。噬菌體存在病毒的生物學特點，即個體渺小，構造簡略，只含有一種核酸DNA或RNA，只能在活的細胞內(nèi)以復制方法進行滋生。噬菌體有蝌蚪形、球形和細桿狀3種狀態(tài)。多數(shù)噬菌體呈蝌蚪形，由頭部和尾部組成。頭部衣殼跟尾部的化學組成是蛋白質，頭部衣殼內(nèi)存有噬菌體的遺傳物質核酸DNA或RNA，尾部有能辨認宿主菌細胞名義的特別受體，與噬菌體吸附有關。
噬菌體的分離技術試驗：
1.制備菌懸液：取大腸桿菌斜面一支，加4ml無菌水洗下菌苔，制成菌懸液。
2.增殖培養(yǎng)：于100ml三倍濃縮的肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基的三角燒瓶中，加入污水樣品200ml與大腸桿菌懸液2ml，37℃培養(yǎng)12-24小時。
3.制備裂解液：將以上混合培養(yǎng)液2500r/min離心15分鐘。將以滅菌的蔡氏過濾器用無菌操作安裝于滅菌抽濾瓶上，用橡皮管連接抽濾瓶與安全瓶，安全瓶再連接于真空泵。將離心上清夜倒入濾器，開動真空泵，過濾除菌。所得濾液倒入滅菌三角瓶內(nèi)，37℃培養(yǎng)過夜，以作無菌檢查。
4.確證試驗
經(jīng)無菌檢查沒有細菌生長的濾液作進一步證明噬菌體的存在。
?、儆谌飧嗟鞍纂谁傊桨迳霞右坏未竽c桿菌懸液，再用滅菌玻璃涂布器將菌液涂布成均勻的一薄層；
?、诖桨寰焊珊?，分散滴加數(shù)小滴濾液于平板菌層上面，里37℃培養(yǎng)過夜。如果在滴加濾液處形成無菌生長的透明噬菌斑，便證明濾液中有大腸桿菌噬菌體。
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更新時間：2021-01-14
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